附件：肌酐測(cè)定試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2020年第14號(hào)）.doc

肌酐測(cè)定試劑注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)肌酐（Creatinine，Cr）測(cè)定試劑注冊(cè)申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門審評(píng)注冊(cè)申報(bào)資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對(duì)肌酐測(cè)定試劑的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中的具體內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特征對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。如申請(qǐng)人認(rèn)為有必要增加本指導(dǎo)原則不包含的研究?jī)?nèi)容，可自行補(bǔ)充。

本指導(dǎo)原則是供申請(qǐng)人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊(cè)審批等行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

肌酐測(cè)定試劑用于體外定量測(cè)定人血清、血漿或尿液中的肌酐含量。本指導(dǎo)原則僅適用于采用肌氨酸氧化酶法，利用全自動(dòng)、半自動(dòng)生化分析儀或分光光度計(jì)，在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行肌酐定量測(cè)定所使用的臨床化學(xué)體外診斷試劑?；谄渌椒ǖ募◆麥y(cè)定試劑盒可參照本指導(dǎo)原則，但應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中的內(nèi)容是否適用，若不適用，應(yīng)另外選擇適合自身方法學(xué)特性的研究步驟及方法。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號(hào)），肌酐檢測(cè)試劑管理類別為Ⅱ類。

二、注冊(cè)申報(bào)資料要求

（一）綜述資料

血液中的肌酐來(lái)源包括從食物中攝取的外源性Cr（約占10%）和機(jī)體內(nèi)生成的內(nèi)源性Cr兩部分，血Cr幾乎全部經(jīng)腎小球?yàn)V過進(jìn)入原尿，并且不被腎小管重吸收；機(jī)體內(nèi)Cr每日生成量幾乎保持恒定。因此，血中Cr濃度穩(wěn)定，測(cè)定血Cr濃度可反映腎小球的濾過功能。尿液肌酐由血液中肌酐經(jīng)腎小球?yàn)V出，不被腎小管重吸收。血、尿肌酐同時(shí)測(cè)定可用于計(jì)算內(nèi)生肌酐清除率，以評(píng)價(jià)腎小球?yàn)V過功能。

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、生物安全性評(píng)價(jià)、研究結(jié)果的總結(jié)評(píng)價(jià)以及同類產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)外上市情況介紹等內(nèi)容，其中同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、臨床應(yīng)用情況、申報(bào)注冊(cè)產(chǎn)品與目前市場(chǎng)上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的異同方面進(jìn)行介紹。應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》的相關(guān)要求。

（二）主要原材料的研究資料（如需提供）

主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及試驗(yàn)驗(yàn)證研究資料；質(zhì)控品（如包含）、校準(zhǔn)品（如包含）的原料選擇、制備、質(zhì)控品定值過程及試驗(yàn)資料；校準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、試驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

主要工藝包括：配制、分裝等描述及確定依據(jù)，應(yīng)包含產(chǎn)品的工藝流程圖和關(guān)鍵控制點(diǎn)；反應(yīng)體系包括樣本采集及處理、樣本要求、樣本與試劑用量、反應(yīng)條件（溫度、時(shí)間等）等研究資料。不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別詳述。

（四）分析性能評(píng)估資料

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)提交產(chǎn)品研制或成品驗(yàn)證階段對(duì)試劑盒進(jìn)行的所有性能驗(yàn)證的研究資料，對(duì)于每項(xiàng)分析性能的評(píng)價(jià)都應(yīng)包括具體的研究?jī)?nèi)容、試驗(yàn)設(shè)計(jì)、研究方法、可接受標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)方法、研究結(jié)論等詳細(xì)資料。性能評(píng)估時(shí)應(yīng)將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個(gè)整體進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)估整個(gè)系統(tǒng)的性能是否符合要求。有關(guān)分析性能驗(yàn)證的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中有所體現(xiàn)，包括試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)、檢驗(yàn)人員、適用儀器、試劑規(guī)格和批號(hào)、所選用的校準(zhǔn)品和質(zhì)控品、臨床樣本來(lái)源等。

性能評(píng)估應(yīng)至少包括試劑空白吸光度、分析靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度、線性區(qū)間、分析特異性和其他影響檢測(cè)的因素。此處僅描述了性能評(píng)估的常規(guī)方法，申請(qǐng)人亦可采用其它合理方法，對(duì)產(chǎn)品性能進(jìn)行研究（如檢測(cè)限等）。

1.試劑空白吸光度

用生理鹽水或其他指定溶液作為樣本在37℃、制造商規(guī)定的波長(zhǎng)、1cm光徑條件下，測(cè)試試劑，測(cè)試所得吸光度即為試劑空白吸光度測(cè)定值，測(cè)定結(jié)果應(yīng)符合要求。

2.分析靈敏度

試劑盒測(cè)試已知濃度為（100±10）μmol/L的被測(cè)物時(shí)，記錄試劑在37℃、制造商規(guī)定的波長(zhǎng)、1cm光徑條件下的吸光度變化值。換算為100μmol/L的吸光度變化，結(jié)果應(yīng)符合要求。

3.準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)包括：相對(duì)偏差和比對(duì)試驗(yàn)等方法，優(yōu)先選用相對(duì)偏差的方法

3.1相對(duì)偏差

建議優(yōu)先選用國(guó)家參考物質(zhì)或國(guó)際參考物質(zhì)，合理設(shè)置2—3個(gè)濃度，將其作為樣本進(jìn)行檢測(cè)，每個(gè)樣本重復(fù)測(cè)定3次，測(cè)試結(jié)果記為（Xi），按公式（1）分別計(jì)算相對(duì)偏差（Bi），如果3次結(jié)果都符合要求，即判為合格。如果3次結(jié)果中有2次結(jié)果符合，1次結(jié)果不符合要求，則應(yīng)重新連續(xù)測(cè)試20次，并分別按照公式（1）計(jì)算相對(duì)偏差，如果大于等于19次測(cè)試的結(jié)果符合要求，即判為合格，準(zhǔn)確度符合要求。

式中：

Bi—相對(duì)偏差；

Xi—測(cè)量濃度；

T—參考物質(zhì)標(biāo)示值。

3.2比對(duì)試驗(yàn)

采用已公開發(fā)布的參考方法或國(guó)內(nèi)已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報(bào)試劑同時(shí)檢測(cè)一批待測(cè)樣本，從測(cè)定結(jié)果間的差異了解擬申報(bào)試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚在允許的誤差范圍內(nèi)，說(shuō)明兩檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)樣本測(cè)定結(jié)果基本相符，對(duì)同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋，擬申報(bào)試劑與參比方法相比不會(huì)產(chǎn)生差異結(jié)果。

在實(shí)施方法學(xué)比對(duì)前，應(yīng)分別對(duì)擬申報(bào)試劑和對(duì)比試劑進(jìn)行初步評(píng)估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)控要求后方可進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)。方法學(xué)比對(duì)時(shí)應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對(duì)結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

4.精密度

4.1重復(fù)性

申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)重復(fù)性指標(biāo)的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，對(duì)可能影響重復(fù)性的主要變量加以考慮，除申報(bào)產(chǎn)品本身的影響外，還應(yīng)對(duì)檢測(cè)儀器、操作者、地點(diǎn)、時(shí)間等要素進(jìn)行相應(yīng)的考慮。

重復(fù)性的評(píng)估可在線性范圍內(nèi)選取低濃度和高濃度的樣本進(jìn)行檢測(cè)，其中一個(gè)濃度樣本應(yīng)為（100±10）μmol/L。在各種重復(fù)性條件下，分別重復(fù)測(cè)定樣本10次，計(jì)算10次測(cè)定結(jié)果的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），根據(jù)公式（2）得出變異系數(shù)（CV），結(jié)果均應(yīng)符合要求。

式中：

CV—變異系數(shù)；

SD—10次測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差；

x—10次測(cè)量結(jié)果的平均值。

4.2批間差

用濃度為（100±10）μmol/L的待測(cè)樣本分別測(cè)試3個(gè)不同批號(hào)的試劑，每個(gè)批號(hào)測(cè)定3次，按公式（3）、公式（4）計(jì)算均值T和相對(duì)極差（R），相對(duì)極差應(yīng)符合要求。

5.線性區(qū)間

建立試劑線性區(qū)間所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測(cè)的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測(cè)定上限的人血清（或其他人源樣本），且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對(duì)樣本基質(zhì)的影響。

建立一種定量測(cè)定方法的線性區(qū)間時(shí)，需在預(yù)期測(cè)定范圍內(nèi)選擇7—11個(gè)濃度水平。例如，將預(yù)期測(cè)定范圍加寬至130%，在此范圍內(nèi)選擇更多的濃度水平，然后依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果逐漸減少數(shù)據(jù)點(diǎn)直至表現(xiàn)出線性關(guān)系，確定線性區(qū)間。

劑量—反應(yīng)曲線的線性可用接近線性區(qū)間下限的低濃度樣本稀釋接近線性區(qū)間上限的高濃度樣本，混合成多個(gè)稀釋濃度（xi），分別測(cè)試試劑盒，每個(gè)稀釋濃度測(cè)試3次，分別求出測(cè)定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測(cè)定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（5）計(jì)算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。相關(guān)系數(shù)應(yīng)符合要求。

稀釋濃度（xi）代入線性回歸方程，計(jì)算yi的估計(jì)值及yi與估計(jì)值的相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差。相對(duì)偏差或絕對(duì)偏差應(yīng)符合要求。

6.分析特異性

6.1交叉反應(yīng)：驗(yàn)證易產(chǎn)生交叉反應(yīng)的其他結(jié)構(gòu)類似物，應(yīng)至少驗(yàn)證肌酸交叉反應(yīng)情況?？刹捎眉兤肺镔|(zhì)分別添加到健康人樣本、參考區(qū)間附近樣本中的方式進(jìn)行驗(yàn)證。

6.2干擾物質(zhì)：驗(yàn)證樣本中常見的干擾物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，如膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯、抗壞血酸等。待評(píng)價(jià)肌酐樣本濃度應(yīng)至少包含臨近醫(yī)學(xué)決定水平（或正常參考區(qū)間上限）。使用醫(yī)學(xué)相關(guān)水平的干擾物質(zhì)濃度（建議為潛在最大濃度）分別進(jìn)行添加，確定是否產(chǎn)生干擾。如有干擾，梯度稀釋干擾物并進(jìn)一步確定可接受的干擾物質(zhì)的最高濃度水平，或產(chǎn)生干擾的濃度水平。應(yīng)使用多份臨床樣本，每個(gè)樣本重復(fù)檢測(cè)不少于3次。申請(qǐng)人應(yīng)描述干擾物質(zhì)的種類，說(shuō)明樣本的制備方法及待測(cè)物的水平，以及不產(chǎn)生干擾的驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)。

藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請(qǐng)人選擇何種藥物及其濃度進(jìn)行，已有文獻(xiàn)報(bào)道羥苯磺酸鈣和酚磺乙胺對(duì)肌酐的測(cè)定有明顯的負(fù)干擾作用，申請(qǐng)人應(yīng)提供這兩種藥物對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響的研究資料。建議將研究結(jié)果在說(shuō)明書中進(jìn)行說(shuō)明。

7.校準(zhǔn)品的量值溯源和質(zhì)控品的賦值（如產(chǎn)品中包含）

校準(zhǔn)品的研究應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》提供詳細(xì)的量值溯源性文件，內(nèi)容應(yīng)包括量值溯源的方法和可接受標(biāo)準(zhǔn)，以及各個(gè)層次的量值傳遞和確認(rèn)過程，并充分考慮不確定度的影響，校準(zhǔn)品應(yīng)首選與臨床樣本相同或相似的基質(zhì)，如存在差異，需要進(jìn)行基質(zhì)效應(yīng)評(píng)估。質(zhì)控品應(yīng)提交在所有適用機(jī)型上進(jìn)行的定值資料。

8.其他需注意問題

應(yīng)當(dāng)對(duì)多批產(chǎn)品進(jìn)行性能評(píng)估，對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。不同適用機(jī)型，應(yīng)分別提交分析性能評(píng)估資料。如注冊(cè)申請(qǐng)中包含不同的包裝規(guī)格，需要對(duì)不同包裝規(guī)格之間的差異進(jìn)行分析或驗(yàn)證。如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，需要提交每個(gè)包裝規(guī)格產(chǎn)品進(jìn)行上述項(xiàng)目評(píng)估的試驗(yàn)資料及總結(jié)。如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說(shuō)明，具體說(shuō)明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

試劑盒的樣本類型如包括血清和血漿樣本，則應(yīng)對(duì)二者進(jìn)行相關(guān)性研究以確認(rèn)二者檢測(cè)結(jié)果的一致性。對(duì)于血漿樣本，申請(qǐng)人應(yīng)對(duì)不同的抗凝劑進(jìn)行研究以確認(rèn)最適的抗凝條件以及抗凝劑是否會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。不同樣本類型如血清和尿液應(yīng)分別進(jìn)行分析性能評(píng)估。

（五）參考區(qū)間確定資料

提供參考區(qū)間確定所采用的樣本來(lái)源、確定方法及詳細(xì)的試驗(yàn)資料。如不同性別或不同年齡段的參考區(qū)間不同，應(yīng)保證建立單個(gè)參考區(qū)間的樣本數(shù)量符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，不同類型的樣本如血清和尿液的參考區(qū)間應(yīng)分別制定。若引用針對(duì)中國(guó)人群參考區(qū)間研究的相關(guān)權(quán)威指南，應(yīng)明確說(shuō)明出處，提交文獻(xiàn)資料并說(shuō)明引用依據(jù)，應(yīng)采用一定數(shù)量的臨床樣本對(duì)該參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。說(shuō)明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述應(yīng)與參考區(qū)間研究結(jié)論保持一致。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報(bào)試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。

試劑的穩(wěn)定性可參考YY/T 1579-2018《體外診斷醫(yī)療器械-體外診斷試劑穩(wěn)定性評(píng)價(jià)》要求進(jìn)行研究，包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性、運(yùn)輸穩(wěn)定性和使用穩(wěn)定性（包含在機(jī)穩(wěn)定性、復(fù)溶和開瓶穩(wěn)定性）等，申請(qǐng)人應(yīng)至少提供3批試劑、多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究資料，包括研究目的、材料和方法、研究結(jié)論等，研究應(yīng)涵蓋產(chǎn)品的主要性能指標(biāo)，申請(qǐng)人應(yīng)至少能提供在實(shí)際儲(chǔ)存條件下超過聲稱有效期的評(píng)價(jià)資料。試劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)注意選取代表性包裝規(guī)格進(jìn)行研究（例如：校準(zhǔn)品穩(wěn)定性應(yīng)選取最易受影響的最小裝量）。凍干劑型應(yīng)提供復(fù)溶穩(wěn)定性研究資料。

適用樣本的穩(wěn)定性研究應(yīng)包括說(shuō)明書推薦的所有樣本儲(chǔ)存條件下的有效期驗(yàn)證，可以在合理溫度范圍內(nèi)選擇溫度點(diǎn)（溫度范圍），每間隔一定的時(shí)間段即對(duì)儲(chǔ)存樣本進(jìn)行分析驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的效期穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對(duì)凍融次數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。樣本在不同儲(chǔ)存條件下的穩(wěn)定性期限若有相關(guān)文獻(xiàn)中已明確說(shuō)明，亦可作為依據(jù)。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果應(yīng)在說(shuō)明書【儲(chǔ)存條件及有效期】和【樣本要求】?jī)身?xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

（七）臨床評(píng)價(jià)資料

根據(jù)《關(guān)于公布新修訂免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)醫(yī)療器械目錄的通告》（國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告2018年第94號(hào)），肌酐檢測(cè)試劑可免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)，申請(qǐng)人可依照《免于進(jìn)行臨床試驗(yàn)的體外診斷試劑臨床評(píng)價(jià)資料基本要求（試行）》開展評(píng)價(jià)。申請(qǐng)人如無(wú)法或不適于按照上述要求對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)，則應(yīng)按照《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求開展臨床試驗(yàn)。

下面僅對(duì)臨床試驗(yàn)中的基本問題進(jìn)行闡述。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，對(duì)比試劑在預(yù)期用途、適用人群、樣本類型、檢測(cè)性能等方面應(yīng)與試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱考核試劑）具有較好的可比性，與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，證明考核試劑與已上市產(chǎn)品等效。

2.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的選擇

應(yīng)在至少兩家于醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)備案管理系統(tǒng)中備案的臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)試驗(yàn)操作人員應(yīng)有足夠的時(shí)間熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評(píng)價(jià)方案。在整個(gè)試驗(yàn)中，考核試劑和對(duì)比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床試驗(yàn)方案。建議臨床前開展預(yù)試驗(yàn)工作，最大限度地控制試驗(yàn)誤差。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)本試驗(yàn)的技術(shù)人員操作完成，申報(bào)單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉試驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗(yàn)都應(yīng)記錄在案并明確說(shuō)明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)選用的對(duì)比試劑應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。另外，考核試劑的樣本類型應(yīng)不超越對(duì)比試劑的樣本類型。

臨床試驗(yàn)方案必須獲得臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)倫理委員會(huì)的同意。

4.受試者選擇

臨床試驗(yàn)受試者應(yīng)來(lái)自產(chǎn)品預(yù)期用途所聲稱的適用人群。樣本中待測(cè)物濃度應(yīng)覆蓋考核試劑線性區(qū)間，且盡可能均勻分布?？傮w樣本數(shù)不少于200例，異常值樣本比例應(yīng)不低于試驗(yàn)總量的30%，同時(shí)符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求。應(yīng)明確樣本儲(chǔ)存條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本，血漿應(yīng)明確抗凝劑的要求。試驗(yàn)中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無(wú)法避免使用貯存樣本時(shí)，注明貯存條件及時(shí)間，在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)考慮其影響。

如果考核試劑同時(shí)適用于多個(gè)樣本類型，具有可比性樣本如血清、血漿，可進(jìn)行同源性比對(duì)。不同樣本類型如血清、尿液樣本，建議分別進(jìn)行臨床試驗(yàn)。

5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法，結(jié)合臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布等情況，建議統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計(jì)分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測(cè)結(jié)果無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。如相關(guān)分析、線性回歸、絕對(duì)偏倚/偏差及相對(duì)偏倚/偏差分析、配對(duì)t檢驗(yàn)等?？己嗽噭┖蛯?duì)比試劑兩組檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。在臨床試驗(yàn)方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評(píng)價(jià)考核試劑與對(duì)比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告撰寫

臨床試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法。具體撰寫內(nèi)容應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》的要求。

（八）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料

對(duì)體外診斷試劑產(chǎn)品壽命周期的各個(gè)環(huán)節(jié)，從產(chǎn)品設(shè)計(jì)開發(fā)、原材料的采購(gòu)控制、生產(chǎn)、預(yù)期用途、可能的使用錯(cuò)誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面的判定以及對(duì)患者風(fēng)險(xiǎn)的估計(jì)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)分析、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)控制基礎(chǔ)上，形成風(fēng)險(xiǎn)管理報(bào)告。應(yīng)當(dāng)符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

風(fēng)險(xiǎn)分析應(yīng)包含但不僅限于以下方面的內(nèi)容：

預(yù)期用途錯(cuò)誤包括：設(shè)計(jì)開始時(shí)未設(shè)定預(yù)期分析物、未作適用機(jī)型驗(yàn)證、未針對(duì)特定的樣本類型驗(yàn)證。性能特征失效包括：精密度失效、準(zhǔn)確度失效、特異性失效、穩(wěn)定性失效、測(cè)量范圍失效、定性/定量失效、量值溯源失效、校準(zhǔn)失效。不正確的結(jié)果包括：配方錯(cuò)誤、采購(gòu)的原料未能達(dá)到設(shè)計(jì)要求的性能、原材料儲(chǔ)存條件不正確、使用了過期的原材料、反應(yīng)體系不正確、試劑與包裝材料不相容?？赡艿氖褂缅e(cuò)誤包括：生產(chǎn)者未按照生產(chǎn)流程操作，檢驗(yàn)者未按照原料、半成品、成品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作，裝配過程組分、標(biāo)簽、說(shuō)明書等漏裝或誤裝，成品儲(chǔ)存或運(yùn)輸不當(dāng)，客戶未參照產(chǎn)品說(shuō)明書設(shè)置參數(shù)或使用。與安全性有關(guān)的特征包括：有毒化學(xué)試劑的化學(xué)污染、樣本的潛在生物污染、不可回收包裝或塑料的環(huán)境污染。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請(qǐng)人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)注冊(cè)申請(qǐng)人產(chǎn)品研制、前期臨床評(píng)價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)，按照《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標(biāo)和檢驗(yàn)方法。

下面就產(chǎn)品技術(shù)要求中涉及的產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和主要性能指標(biāo)等相關(guān)內(nèi)容作簡(jiǎn)要敘述。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)

GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》

GB/T 29791.1—2013《體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息標(biāo)示第1部分：術(shù)語(yǔ)定義和通用要求》

GB/T 29791.2—2013《體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息標(biāo)示第2部分：專業(yè)用體外診斷試劑》

GB/T 26124—2011《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）》

YY/T 1227—2014 《臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）命名》

YY/T 0638—2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測(cè)量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)物中酶催化濃度賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》

YY/T 1231—2014《肌酐測(cè)定試劑（盒）（肌氨酸氧化酶法）》

YY/T 1579—2018 《體外診斷醫(yī)療器械體外診斷試劑穩(wěn)定性評(píng)價(jià)》

YY/T 0466.1—2016《醫(yī)療器械用于醫(yī)療器械標(biāo)簽、標(biāo)記和提供信息的符號(hào)第1部分：通用要求》

YY/T 0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》

2.性能指標(biāo)

產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)至少包括外觀、裝量、空白吸光度、分析靈敏度、線性區(qū)間、重復(fù)性、批間差、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性等，以上指標(biāo)應(yīng)至少符合YY/T 1231—2014《肌酐測(cè)定試劑（盒）（肌氨酸氧化酶法）》的要求。

校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的性能指標(biāo)（如產(chǎn)品中包含）應(yīng)至少包含外觀、裝量（干粉試劑可不做）、準(zhǔn)確性、重復(fù)性、批內(nèi)瓶間差和穩(wěn)定性。凍干型校準(zhǔn)品和質(zhì)控品還應(yīng)包括含水量和復(fù)溶穩(wěn)定性。

（十）產(chǎn)品注冊(cè)檢驗(yàn)報(bào)告

申請(qǐng)人應(yīng)提交具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗(yàn)資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的檢驗(yàn)報(bào)告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評(píng)價(jià)意見。若有適用的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品，應(yīng)當(dāng)使用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品、參考品進(jìn)行注冊(cè)檢驗(yàn)，并符合相關(guān)要求。

（十一）產(chǎn)品說(shuō)明書和標(biāo)簽

1.說(shuō)明書

說(shuō)明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗(yàn)原理、檢測(cè)結(jié)果解釋以及注意事項(xiàng)等重要信息，是指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果給出合理醫(yī)學(xué)解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說(shuō)明書是體外診斷試劑注冊(cè)申報(bào)最重要的文件之一。

結(jié)合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的通告》的要求，下面對(duì)肌酐測(cè)定試劑盒說(shuō)明書的重點(diǎn)內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

1.1【產(chǎn)品名稱】

根據(jù)《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法》中的命名原則，產(chǎn)品名稱通常由被測(cè)物質(zhì)的名稱、用途、方法或原理三部分組成，方法或原理部分應(yīng)能體現(xiàn)具體反應(yīng)原理，建議參考分類目錄或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。例如：肌酐測(cè)定試劑盒（肌氨酸氧化酶法）。

1.2【包裝規(guī)格】

注明可測(cè)試的樣本數(shù)或裝量，如××測(cè)試/盒、××人份/盒、××mL，除國(guó)際通用計(jì)量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進(jìn)行表述。

1.3【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

1.3.1說(shuō)明試劑盒用于體外定量測(cè)定血清、血漿或尿液中肌酐的含量。

1.3.2肌酐異常情況常見于哪些疾病，同時(shí)應(yīng)明確與目的檢測(cè)物相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋，說(shuō)明相關(guān)的臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法等。

1.4【檢驗(yàn)原理】

應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡(jiǎn)要說(shuō)明檢驗(yàn)的原理、方法，必要時(shí)可采取圖示方法表示，檢測(cè)原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測(cè)物和產(chǎn)物的關(guān)系進(jìn)行描述：

如：樣本中的Cr在肌酐酶的催化下水解生成肌酸。在肌酸酶的催化下肌酸水解生成肌氨酸和尿素。肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化成甘氨酸、甲醛和H2O2，最后偶聯(lián)Trinder反應(yīng)，比色法測(cè)定，反應(yīng)形成的色素與肌酐的濃度成正比。反應(yīng)式如下:

第一反應(yīng):消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾反應(yīng)

1.5【主要組成成分】

應(yīng)明確以下內(nèi)容：

試劑盒提供的試劑組分的名稱、數(shù)量、每個(gè)組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度。明確說(shuō)明不同批號(hào)試劑盒中各組分是否可以互換。

如產(chǎn)品中包含校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)注明校準(zhǔn)品的定值及其溯源性。應(yīng)注明質(zhì)控品的靶值范圍。如靶值范圍為批特異，可注明批特異，并附單獨(dú)的靶值單。

1.6【儲(chǔ)存條件及有效期】

應(yīng)明確未開封的試劑生產(chǎn)日期、實(shí)際儲(chǔ)存條件及有效期，開封后的在機(jī)穩(wěn)定性或開瓶穩(wěn)定性。凍干粉試劑應(yīng)明確復(fù)溶穩(wěn)定性。并應(yīng)明確環(huán)境溫濕度、避光條件等。注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”、“室溫”。

1.7【適用儀器】

應(yīng)明確可適用的具體品牌、型號(hào)的生化分析儀器。

1.8【樣本要求】

重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存條件及保存期限，如有血漿樣本，應(yīng)注明對(duì)抗凝劑的要求（如：草酸鹽、檸檬酸鹽、EDTA鈉鹽對(duì)肌酐含量造成干擾，應(yīng)避免使用）。如有尿液樣本，各廠家應(yīng)對(duì)樣本測(cè)定給出具體方法，比如是否稀釋、稀釋方法等。應(yīng)明確冷藏/冷凍樣本檢測(cè)前是否需恢復(fù)室溫，可凍融次數(shù)。

當(dāng)待測(cè)樣本存在脂濁、嚴(yán)重黃疸、溶血時(shí)，對(duì)本方法有干擾，應(yīng)盡量避免此類樣本。

1.9【檢驗(yàn)方法】

詳細(xì)說(shuō)明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟，包括：

1.9.1試劑配制方法、注意事項(xiàng)；

1.9.2試驗(yàn)條件：溫度、時(shí)間、測(cè)定主/副波長(zhǎng)、比色杯光徑、試劑用量、樣本用量、測(cè)定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向、反應(yīng)時(shí)間等以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)；

1.9.3校準(zhǔn)：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項(xiàng)、校準(zhǔn)曲線的繪制；

1.9.4質(zhì)量控制：質(zhì)控品的使用方法、對(duì)質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；

1.9.5檢驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算：應(yīng)明確檢驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算方法，若申請(qǐng)人聲稱超出線性區(qū)間的樣本可進(jìn)行稀釋后測(cè)定，則應(yīng)提供樣本的最大可稀釋倍數(shù)研究資料，說(shuō)明稀釋液類型。

1.10【參考區(qū)間】

應(yīng)注明所有適用樣本類型的正常參考區(qū)間，并說(shuō)明參考區(qū)間確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考區(qū)間”。

1.11【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

說(shuō)明可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的因素，在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。

1.12【檢驗(yàn)方法的局限性】

1.12.1說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，不能單獨(dú)作為確診或排除病例的依據(jù)。

1.12.2說(shuō)明該檢驗(yàn)方法由于哪些原因會(huì)使測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生偏離，或測(cè)量結(jié)果還不能完全滿足臨床需要。如：存在的干擾因素，明確膽紅素、血紅蛋白、甘油三酯、抗壞血酸及藥物等內(nèi)、外源性干擾物對(duì)測(cè)定的影響，同時(shí)列出干擾物的具體濃度。

1.13【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

至少應(yīng)詳述以下性能指標(biāo)：

1.13.1試劑空白吸光度；

1.13.2分析靈敏度；

1.13.3準(zhǔn)確度；

1.13.4精密度（重復(fù)性和批間差）；

1.13.5線性區(qū)間（線性相關(guān)系數(shù)和線性偏差）；

1.13.6校準(zhǔn)品、質(zhì)控品性能。（如包含）

1.14【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

1.14.1本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果僅供臨床參考，對(duì)患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

1.14.2本試劑盒僅供體外檢測(cè)使用，試劑中含有的化學(xué)成分應(yīng)說(shuō)明接觸人體后產(chǎn)生不良的影響后果及應(yīng)急處理措施。

1.14.3采用不同方法學(xué)的試劑檢測(cè)所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯(cuò)誤的醫(yī)學(xué)解釋，建議實(shí)驗(yàn)室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測(cè)報(bào)告中注明所用試劑特征（如參考區(qū)間或方法學(xué)）。

1.14.4有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項(xiàng)目的檢測(cè)。但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測(cè)可以確保絕對(duì)安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對(duì)待。

1.14.5樣本：對(duì)所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對(duì)待。

1.14.6其他有關(guān)肌酐測(cè)定的注意事項(xiàng)。

1.15【標(biāo)識(shí)的解釋】

如有圖形或符號(hào)，請(qǐng)解釋其代表的意義。

1.16【參考文獻(xiàn)】

注明引用參考文獻(xiàn)，其書寫應(yīng)清楚、易查詢且格式規(guī)范統(tǒng)一。

1.17【基本信息】

根據(jù)《體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求編寫。

1.18【醫(yī)療器械注冊(cè)證編號(hào)/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)】

1.19【說(shuō)明書核準(zhǔn)日期及修改日期】

2.標(biāo)簽

標(biāo)簽中的內(nèi)容應(yīng)符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》，標(biāo)簽中應(yīng)至少載明：

2.1產(chǎn)品名稱和包裝規(guī)格；

2.2注冊(cè)人名稱、住所、聯(lián)系方式，進(jìn)口醫(yī)療器械還應(yīng)當(dāng)載明代理人的名稱、住所及聯(lián)系方式；

2.3醫(yī)療器械注冊(cè)證號(hào)；

2.4產(chǎn)品批號(hào)；

2.5生產(chǎn)日期，使用期限或者失效日期；

2.6特殊儲(chǔ)存、操作條件或者說(shuō)明；

2.7必要的警示、注意事項(xiàng)。

除以上內(nèi)容外，應(yīng)在標(biāo)簽中明確“其他內(nèi)容詳見說(shuō)明書”，標(biāo)簽中的內(nèi)容不得多于說(shuō)明書中的內(nèi)容，并應(yīng)當(dāng)與說(shuō)明書中的內(nèi)容相符合。

三、審查關(guān)注點(diǎn)

（一）產(chǎn)品技術(shù)要求中性能指標(biāo)的設(shè)定及檢驗(yàn)方法是否符合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求；技術(shù)要求的格式是否符合《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號(hào)）的相關(guān)規(guī)定。

（二）產(chǎn)品說(shuō)明書的編寫內(nèi)容及格式是否符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說(shuō)明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）的要求，相關(guān)內(nèi)容是否符合《醫(yī)療器械說(shuō)明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號(hào)）中對(duì)說(shuō)明書的要求。

（三）分析性能評(píng)估指標(biāo)及結(jié)果是否支持產(chǎn)品技術(shù)要求的確定；是否滿足本指導(dǎo)原則中各指標(biāo)驗(yàn)證的要求。

（四）參考區(qū)間確定使用的方法是否合理，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)是否符合統(tǒng)計(jì)學(xué)的相關(guān)要求，結(jié)論是否和說(shuō)明書聲稱一致。

（五）試劑的穩(wěn)定性研究方法是否合理，穩(wěn)定性結(jié)論是否和說(shuō)明書聲稱一致。

（六）產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析資料的撰寫是否符合YY/T 0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

四、編寫單位

重慶市醫(yī)療器械技術(shù)審評(píng)認(rèn)證中心。