附件：載脂蛋白B測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則（2018年第9號）.doc

載脂蛋白B測定試劑注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對載脂蛋白B測定試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導(dǎo)原則是對載脂蛋白B測定試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進(jìn)行充實和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是供申請人和審查人員使用的指導(dǎo)文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細(xì)的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)體系的不斷完善和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

載脂蛋白B測定試劑為透射比濁法（ITA），基于分光光度法原理，利用全自動、半自動生化分析儀或分光光度計，用于體外定量測定人血清和/或血漿中的載脂蛋白B的含量。不包括免疫散射比濁法。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），載脂蛋白B測定試劑盒管理類別為二類，分類代號為6840。

目前載脂蛋白B的測試方法主要為免疫比濁法，血清或血漿中載脂蛋白B與試劑中的特異性抗人載脂蛋白B抗體相結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物而產(chǎn)生濁度。在340nm處測定吸光度，吸光度變化與標(biāo)本中載脂蛋白B的濃度成正相關(guān)。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、臨床意義、產(chǎn)品描述、方法學(xué)特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。相關(guān)描述應(yīng)至少包含如下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品預(yù)期用途與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況

載脂蛋白B（ApoB）主要在肝臟合成，是低密度脂蛋白（LDL）的主要結(jié)構(gòu)蛋白，并作為LDL受體的配體，可調(diào)節(jié)LDL從血漿中的清除速率。血液中ApoB的測定值直接反應(yīng)LDL含量。

ApoB水平高低的臨床意義與低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）相似，是各項血脂指標(biāo)中較好的動脈硬化標(biāo)志物。在少數(shù)情況下，可出現(xiàn)高ApoB血癥而LDL-C正常的情況，提示血液中存在較多小而密的LDL，測定ApoB更有優(yōu)勢。在對高ApoB血癥的冠心病患者實施藥物干預(yù)實驗中表明，降低ApoB水平可以減少冠心病發(fā)病及促進(jìn)粥樣斑塊的消退。此外，ApoB增高也常見于腎病綜合征、未控制的糖尿病、活動性肝炎和肝功能低下患者。

注：若注冊申報產(chǎn)品聲稱臨床意義超出此內(nèi)容范圍，應(yīng)提供相關(guān)文獻(xiàn)或臨床研究依據(jù)。

2.產(chǎn)品描述

包括產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，主要原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝過程及關(guān)鍵控制點，質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的制備方法、賦值過程及量值溯源情況。

3.有關(guān)生物安全性方面的說明

體外診斷試劑中的主要原材料，如果采用動物、病原體、人源的組織或體液等生物材料經(jīng)處理或添加某些物質(zhì)制備而成，應(yīng)當(dāng)提供相應(yīng)的說明文件，證明其在運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境是安全的，并對上述原材料所采用的滅活等試驗方法進(jìn)行說明。人源性材料需對有關(guān)傳染?。℉IV、HBV、HCV等）病原體檢測予以說明，并提供相關(guān)的證明文件。

4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價。

5.其他

包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準(zhǔn)上市的情況。相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。

（二）主要原材料研究資料（如需提供）

主要原材料（例如抗原、抗體及其他主要原料等）的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實驗驗證有關(guān)研究資料；質(zhì)控品（如產(chǎn)品包含）、校準(zhǔn)品（如產(chǎn)品包含）原料選擇、制備、定值過程及試驗資料；校準(zhǔn)品的溯源性文件，包括具體溯源鏈、實驗方法、數(shù)據(jù)及統(tǒng)計分析等詳細(xì)資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝及反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

主要工藝包括：配制、分裝等描述及確定依據(jù)，應(yīng)包含產(chǎn)品的工藝流程圖、關(guān)鍵工序及特殊工序的控制要求；反應(yīng)體系包括樣本采集及處理、樣本要求、反應(yīng)所需物質(zhì)用量（校準(zhǔn)品、樣本、抗體等）、反應(yīng)條件（溫度、時間等）等研究資料。

（四）分析性能評估資料

1.基本要求

（1）概述：簡單描述試劑的反應(yīng)方法、試劑研制或優(yōu)化的起始時間，性能評估的目的。

（2）列舉性能評估所引用的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和資料。

（3）性能評估使用試劑的組成、包裝規(guī)格、批號、有效期、注冊證信息（如有）。

（4）校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的生產(chǎn)企業(yè)名稱、批號、有效期、注冊證信息。

（5）使用的儀器名稱、型號；測定原理及該儀器的反應(yīng)參數(shù)。

2.性能評估

具體內(nèi)容應(yīng)至少提供3個批次試劑的分析性能評估資料，包括具體的研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、研究結(jié)論等。性能評估時最好將試劑和所選用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品作為一個整體進(jìn)行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。

性能評估應(yīng)至少包括準(zhǔn)確度、試劑空白吸光度、精密度、線性范圍、分析特異性（抗干擾能力）、分析靈敏度、其他影響檢測的因素等。

（1）準(zhǔn)確度

對測量準(zhǔn)確度的評價依次包括：與國家標(biāo)準(zhǔn)品（和/或國際標(biāo)準(zhǔn)品）的偏差分析、企業(yè)參考品測試、比對試驗等方法。（企業(yè)可根據(jù)實際情況選擇合理方法進(jìn)行研究）

a.與國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品的偏差分析

該研究項目已有相應(yīng)國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品，優(yōu)先使用國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗證，重點觀察對相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果的偏差情況。

b.企業(yè)參考品測試

對企業(yè)參考品進(jìn)行檢測，其測量結(jié)果的相對偏差應(yīng)不超過±10%。

c.比對試驗

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的具有溯源性的已上市同類試劑，與擬申報試劑同時檢測一批臨床樣本（至少40例樣本），從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參考方法（同類試劑）對比試劑間的偏倚。如偏倚在允許的誤差范圍內(nèi)，說明擬申報試劑與參考方法（同類試劑）對臨床樣本測定結(jié)果基本一致，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋不會產(chǎn)生差異。

在實施方法學(xué)比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和對比試劑進(jìn)行初步評估，只有在確認(rèn)兩者都分別符合各自相關(guān)的產(chǎn)品技術(shù)要求后方可進(jìn)行比對試驗。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。其中，濃度分布應(yīng)覆蓋產(chǎn)品的可報告范圍。

（2）試劑空白吸光度

用指定空白樣品測試ApoB試劑。在測定分析儀設(shè)定參數(shù)下，記錄主波長下測試反應(yīng)完成后的吸光度（A），測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值，試劑空白吸光度不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

注：空白樣本可以是純水樣本、生理鹽水、零校準(zhǔn)液等。

（3）精密度

測量精密度的評估應(yīng)至少包括生理和病理兩個濃度水平的樣本進(jìn)行，分別評估重復(fù)性、批間差。

測量精密度的評價方法并無統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)可依，可根據(jù)不同的試劑特征或申請人的研究習(xí)慣進(jìn)行，建議參考CLSI EP15—A3。

（4）分析靈敏度

用已知濃度的樣品進(jìn)行測試，記錄在試劑盒規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。換算為n單位吸光度差值（ΔA），即為本產(chǎn)品的分析靈敏度。

（5）線性范圍

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

超出線性范圍的樣本如需稀釋后測定，應(yīng)作相關(guān)研究，明確稀釋液類型及最大可稀釋倍數(shù)，研究過程應(yīng)注意基質(zhì)效應(yīng)影響，必要時應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。

（6）分析特異性

應(yīng)明確已知干擾因素對測定結(jié)果的影響：可采用回收實驗對不同濃度的溶血、黃疸、脂血對檢測結(jié)果的影響進(jìn)行評價，干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，明確干擾物質(zhì)影響的最大濃度。藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請人選擇是否進(jìn)行或選擇何種藥物及其濃度進(jìn)行。

（7）其他需注意問題

a.不同適用機型的反應(yīng)條件應(yīng)分別評估。

不同樣本類型（血清和血漿）應(yīng)分別進(jìn)行分析性能評估。對于血漿樣本，確認(rèn)最適的抗凝劑或明顯干擾檢測結(jié)果的抗凝劑。

b.校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值

應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度的研究資料，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的研究資料。

c.包裝規(guī)格

注冊申請包含不同的包裝規(guī)格，需要對不同包裝規(guī)格進(jìn)行分析或驗證。如不同的包裝規(guī)格產(chǎn)品間存在性能差異，提交每個包裝規(guī)格產(chǎn)品項目評估的試驗資料及總結(jié)；如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細(xì)說明。

（五）參考區(qū)間確定資料

提供參考區(qū)間確定所采用的樣本來源、確定方法及詳細(xì)的試驗資料，建議參考CLSI/NCCLS C28—A3C。研究結(jié)論應(yīng)與產(chǎn)品說明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述保持一致。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。這里主要指試劑的穩(wěn)定性，通常包括保存期穩(wěn)定性（有效期）、開瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性（如有）等（各3個批次）。申請人應(yīng)至少提供保存期穩(wěn)定性和開瓶穩(wěn)定性、干粉試劑同時應(yīng)提供復(fù)溶穩(wěn)定性研究資料。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論，應(yīng)涵蓋產(chǎn)品中受穩(wěn)定性影響的性能指標(biāo)（如準(zhǔn)確度、線性范圍、重復(fù)性、試劑空白吸光度等）。

保存期穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進(jìn)行詳細(xì)說明。樣本在不同儲存條件下的穩(wěn)定性期限若有相關(guān)文獻(xiàn)中已明確說明，亦可作為依據(jù)。

（七）生產(chǎn)及自檢記錄

提供連續(xù)三批產(chǎn)品生產(chǎn)及自檢記錄的復(fù)印件。

（八）臨床評價資料

臨床評價資料應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）的要求，同時評價資料的形式應(yīng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）中臨床評價資料有關(guān)的規(guī)定。根據(jù)《關(guān)于發(fā)布第三批免于進(jìn)行臨床試驗醫(yī)療器械目錄的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第170號），載脂蛋白B測定試劑可免于進(jìn)行臨床試驗，申請人可依照《總局關(guān)于發(fā)布免于進(jìn)行臨床試驗的體外診斷試劑臨床評價資料基本要求（試行）的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第179號）開展評價。申請人如無法按要求對“目錄”中產(chǎn)品進(jìn)行臨床評價，應(yīng)進(jìn)行臨床試驗。

臨床試驗中的基本要求：

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于試驗用體外診斷試劑的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用試驗用體外診斷試劑與之進(jìn)行對比試驗研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。

2.臨床試驗機構(gòu)的選擇

應(yīng)選擇至少兩家經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局備案的臨床試驗機構(gòu)，臨床試驗機構(gòu)實驗操作人員應(yīng)有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，試驗用體外診斷試劑和對比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床研究方案。各臨床研究機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床研究機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實驗進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。各臨床試驗機構(gòu)選用的對比試劑及所用機型應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。另外，試驗用體外診斷試劑的樣本類型應(yīng)與產(chǎn)品說明書一致，且不應(yīng)超越對比試劑對樣本類型的檢測要求，如果選擇了對比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應(yīng)采用其他合理方法對額外的樣本類型進(jìn)行驗證。

開展體外診斷試劑臨床試驗，申請人應(yīng)當(dāng)按照試驗用體外診斷試劑的類別、風(fēng)險、預(yù)期用途等特性，組織制定科學(xué)、合理的臨床試驗方案。一般應(yīng)當(dāng)包括以下內(nèi)容：

（1）一般信息（包括產(chǎn)品信息、臨床試驗開展的時間和人員等相關(guān)信息、申請人相關(guān)信息等）。

（2）臨床試驗的背景資料。

（3）試驗?zāi)康摹?/p>

（4）試驗設(shè)計。

（5）評價方法。

（6）統(tǒng)計方法。

（7）對臨床試驗方案修正的規(guī)定。

（8）臨床試驗涉及的倫理問題和說明、《知情同意書》文本（如有）。

（9）數(shù)據(jù)處理與記錄保存。

（10）其他需要說明的內(nèi)容。

4.研究對象選擇

臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。申請人在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進(jìn)行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析?？傮w樣本數(shù)不少于200例，異常值樣本數(shù)不少于60例，樣本中待測物濃度應(yīng)覆蓋試驗用體外診斷試劑線性范圍，且盡可能均勻分布。

實驗中，盡可能使用新鮮樣本，如需貯存，應(yīng)明確貯存條件及能否凍融；血漿應(yīng)明確抗凝劑的要求。

申報的樣本類型均應(yīng)在臨床試驗中進(jìn)行驗證。如果聲稱同時適用于血清和血漿樣本，可完成一個樣本類型（血清或血漿）不少于200例的臨床研究，同時可選至少100例同源樣本進(jìn)行血漿和血清比對研究，其中不同濃度樣本分布情況與總例數(shù)中分布情況應(yīng)一致。

如產(chǎn)品發(fā)生涉及檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項，臨床樣本總數(shù)至少為100例，并在至少兩家臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗；變更主要原材料的供應(yīng)商、參考區(qū)間及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗總樣本數(shù)。

5.統(tǒng)計學(xué)分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、一致性分析、絕對偏倚/偏差及相對偏倚/偏差分析等。對于對比實驗的等效性研究，最常用是對試驗用體外診斷試劑和對比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標(biāo)。結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學(xué)負(fù)責(zé)人選擇合理的統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價試驗用體外診斷試劑與對比試劑是否等效的標(biāo)準(zhǔn)。

6.結(jié)果差異樣本的驗證

對于比較研究試驗中測定結(jié)果不符的樣本，應(yīng)采用“金標(biāo)準(zhǔn)”或其他合理的方法進(jìn)行復(fù)核，以便對臨床試驗結(jié)果進(jìn)行分析。如無需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說明理由。

7.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）的要求，臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。申請人或臨床試驗牽頭單位應(yīng)對各臨床試驗機構(gòu)的報告進(jìn)行匯總，并完成臨床試驗總結(jié)報告。

（九）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料

申請人應(yīng)考慮產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié)，從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知及可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風(fēng)險的估計進(jìn)行風(fēng)險分析，應(yīng)符合YY/T 0316—2016《醫(yī)療器械 風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

（十）產(chǎn)品技術(shù)要求

產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）和《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的相關(guān)規(guī)定。產(chǎn)品技術(shù)要求的性能指標(biāo)應(yīng)不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1421—2016《載脂蛋白B測定試劑（盒）》有關(guān)技術(shù)指標(biāo)的要求。

1.主要性能指標(biāo)

1.1外觀

應(yīng)當(dāng)包括試劑的外觀。

1.2裝量

試劑裝量應(yīng)不少于標(biāo)示裝量或規(guī)定限

1.3試劑空白吸光度

在37℃、340nm、1cm光徑條件下，用試劑設(shè)定的反應(yīng)參數(shù)測試空白樣本，記錄試劑吸光度值（A），建議試劑空白吸光度應(yīng)不大于0.15。

1.4分析靈敏度

用已知濃度（1.00±0.50）g/L的樣本測試試劑，記錄試劑（盒）在規(guī)定的參數(shù)下的吸光度差值。換算為1.00g/L載脂蛋白B的吸光度差值（ΔA），應(yīng)不小于0.15。

1.5線性區(qū)間

試劑線性區(qū)間應(yīng)覆蓋[0.40，2.00]g/L

1.5.1線性相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.990。

1.5.2[0.40，2.00]g/L區(qū)間內(nèi)，線性偏差應(yīng)不超過±10%。

用接近線性區(qū)間下限的低濃度樣品稀釋接近線性區(qū)間上限的高濃度樣品，混合成至少5個有效稀釋濃度（xi），分別測試試劑，每個稀釋濃度測試3次，分別求出測定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（1）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

稀釋濃度（xi）代入線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差。

1.6精密度

1.6.1重復(fù)性

在重復(fù)性條件下，用已知濃度的質(zhì)控品或血清樣本，重復(fù)測試至少10次，分別計算測量值的平均值（）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD）。計算變異系數(shù)（CV）應(yīng)不大于3%。

1.6.2批內(nèi)瓶間差（適用于干粉或凍干試劑）

用線性范圍內(nèi)的樣本或質(zhì)控品測試同一批號的10瓶待檢試劑，并計算10個測量值的平均值（1）和標(biāo)準(zhǔn)差（s1）。

用線性范圍內(nèi)的樣本或質(zhì)控品對相同批號的1個待檢試劑重復(fù)測試10次，計算結(jié)果的均值（2）和標(biāo)準(zhǔn)差（s2）。按公式（2）、（3）計算瓶間差的變異系數(shù)（CV），批內(nèi)瓶間差均應(yīng)不大于5%。

當(dāng)s1＜s2時，令CV=0

1.6.3批間差

用（1.00±0.50）g/L的血清樣本或質(zhì)控品分別測試3個不同批號的試劑，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值（i=1,2,3），按公式（4）、（5）計算相對極差（R）。

式中：

試劑批間相對極差應(yīng)不大于10%。

1.7準(zhǔn)確度

1.7.1相對偏差：相對偏差應(yīng)不超過±10%。

用評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（CRM）或其他公認(rèn)的參考物質(zhì)對試劑進(jìn)行測試，重復(fù)檢測3次，取測試結(jié)果均值（M）按式（6）計算相對偏差（B）。

式中：

B—相對偏差；

M—測試結(jié)果均值；

T—有證參考物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人源樣本定值。

1.7.2比對試驗：相關(guān)系數(shù)r≥0.975，斜率應(yīng)在[0.9，1.1]內(nèi)；樣本濃度≤0.50g/L時，偏差應(yīng)不大于0.10g/L；樣本濃度＞0.50g/L時，相對偏差應(yīng)不大于15%；95%檢測樣本應(yīng)符合上述要求。

參照CLSL EP9—A2的方法，用不少于40個在檢測范圍內(nèi)不同濃度的人源樣品，用生產(chǎn)企業(yè)指定的分析系統(tǒng)（具有溯源性）作為比對方法，每份樣品按待測試劑操作方法及比對方法分別測試。用線性回歸方法計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)及每個濃度點的相對偏差或絕對偏差。

1.7.3企業(yè)參考品測試

用企業(yè)參考品對試劑進(jìn)行測試，重復(fù)檢測3次，取測試結(jié)果均值（M），計算相對偏差（B）應(yīng)不超過±10%。

1.8穩(wěn)定性

可選用以下方法之一進(jìn)行驗證：

1.8.1效期穩(wěn)定性：生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)規(guī)定產(chǎn)品的有效期。取到有效期后的樣品檢測試劑空白吸光度、分析靈敏度、線性、準(zhǔn)確度和批內(nèi)重復(fù)性應(yīng)符合技術(shù)要求。

1.8.2熱穩(wěn)定性試驗：檢測線性區(qū)間、準(zhǔn)確度應(yīng)符合技術(shù)要求。

1.9校準(zhǔn)品和質(zhì)控品的性能指標(biāo)（如產(chǎn)品中包含）

應(yīng)至少包含外觀、裝量、準(zhǔn)確度、均一性、穩(wěn)定性。凍干型校準(zhǔn)品和質(zhì)控品還應(yīng)檢測批內(nèi)瓶間差和復(fù)溶穩(wěn)定性。附錄中應(yīng)明確校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的賦值程序。

載脂蛋白B已有國際標(biāo)準(zhǔn)品，試劑盒配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，應(yīng)參照GB/T 21415—2008《體外診斷醫(yī)療器械 生物樣品中量的測量 校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯源性》的要求溯源至國際標(biāo)準(zhǔn)品，并提供校準(zhǔn)品溯源性說明及質(zhì)控品賦值說明。

（十一）產(chǎn)品注冊檢驗報告

首次申請注冊的載脂蛋白B測定試劑盒，應(yīng)該在具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢測機構(gòu)進(jìn)行注冊檢驗。出具注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見。

（十二）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、試驗方法、檢測結(jié)果解釋以及注意事項等重要信息，是指導(dǎo)使用人員正確操作、臨床醫(yī)生準(zhǔn)確理解和合理應(yīng)用試驗結(jié)果的重要技術(shù)性文件。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014第17號）的要求。下面對測定ApoB試劑說明書的重點內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

通用名稱應(yīng)當(dāng)按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）規(guī)定的命名原則進(jìn)行命名，可適當(dāng)參考相關(guān)“分類目錄”和/或國家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。

（1）通用名稱：載脂蛋白B測定試劑盒（免疫比濁法）

（2）英文名稱，例如：Apolipoprotein B test reagent（kit）

2.【包裝規(guī)格】

注明可測試的樣本數(shù)或裝量，如××測試/盒、××人份/盒、××mL，除國際通用計量單位外，其余內(nèi)容均應(yīng)采用中文進(jìn)行表述。如產(chǎn)品有不同組分，可以寫明組分名稱。

（1）包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙試劑類型。

（2）不得多于產(chǎn)品技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格。

（3）如不同包裝規(guī)格有對應(yīng)不同的機型，應(yīng)分別明確適用機型。

3.【預(yù)期用途】

應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

（1）說明試劑盒用于體外定量檢測人血清和/或血漿中載脂蛋白B的含量。

（2）與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，異常情況常見于哪些疾病，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋。

作為支持性資料，申請人應(yīng)提供由教科書、臨床專著、核心期刊文獻(xiàn)或英文SCI文獻(xiàn)等有關(guān)臨床適應(yīng)癥背景的資料。

4.【檢驗原理】

應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗的原理、方法。

血清或血漿中載脂蛋白B與試劑中的特異性抗人載脂蛋白B抗體相結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物而產(chǎn)生濁度。在特定波長（如340nm處）測定吸光度，吸光度變化與標(biāo)本中載脂蛋白B的濃度成正相關(guān)。

5.【主要組成成分】

應(yīng)明確以下內(nèi)容：

試劑盒提供的試劑組分的名稱、數(shù)量、每個組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度。明確說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

如檢測中需使用校準(zhǔn)品或質(zhì)控品，應(yīng)明確說明，并提供校準(zhǔn)品溯源性，溯源性應(yīng)寫明溯源的最高級別，包括標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或參考物的發(fā)布單位及編號，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍等。

6.【儲存條件及有效期】

（1）應(yīng)明確未開封的試劑實際儲存條件及有效期，開瓶穩(wěn)定期。干粉試劑應(yīng)明確復(fù)溶穩(wěn)定期。

（2）說明產(chǎn)品的儲存條件，如：2—8℃、避免/禁止冷凍或-18℃以下等。其他影響穩(wěn)定性的條件，如：光線、濕度等也必須說明。

（3）如試劑盒各組分的穩(wěn)定性不一致，則應(yīng)對各組分的儲存條件和有效期分別進(jìn)行描述。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，穩(wěn)定期限應(yīng)以月或日為單位。

7.【適用儀器】

（1）說明可適用的儀器，并提供與儀器有關(guān)的必要信息以便用戶能夠做出最好的選擇。

（2）應(yīng)寫明具體適用儀器的型號，不能泛指某一系列儀器。

8.【樣本要求】

重點明確以下內(nèi)容：

樣本類型、為保證樣本各組分穩(wěn)定所必需的抗凝劑或保護劑等、保存期限及保存條件（短期、長期），能夠保證樣本穩(wěn)定的儲存、處理和運輸方法、已知的干擾物等。如有血漿樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。

9.【檢驗方法】

詳細(xì)說明試驗操作的各個步驟，包括：

（1）試劑配制方法、注意事項。

（2）試驗條件：反應(yīng)溫度、測定主/副波長、試劑用量、樣本用量、測定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向、反應(yīng)時間等以及試驗過程中的注意事項。

（3）校準(zhǔn)程序（如果需要）：校準(zhǔn)品的使用方法、注意事項、校準(zhǔn)曲線的繪制。

（4）質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。

（5）如果超出線性范圍，樣本需要稀釋測定時，應(yīng)根據(jù)試劑特性說明稀釋液的種類及最大稀釋倍數(shù)。

10.【參考區(qū)間】

應(yīng)注明常用樣本類型及反應(yīng)方式的參考區(qū)間，并說明參考區(qū)間確定方法。注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考區(qū)間”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】

說明可能對試驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素；說明在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗。

12.【檢驗方法的局限性】

說明該檢驗方法的局限性，如：存在的干擾因素，明確黃疸、溶血、脂濁及藥物等內(nèi)、外源性干擾物對測定的影響，同時列出干擾物的具體濃度。

13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

至少應(yīng)詳述以下性能指標(biāo)，性能指標(biāo)應(yīng)不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)技術(shù)指標(biāo)的要求。

（1）試劑空白吸光度。

（2）分析靈敏度。

（3）準(zhǔn)確度。

（4）精密度（重復(fù)性和批間差）。

（5）線性區(qū)間（線性相關(guān)系數(shù)和線性偏差）。

14.【注意事項】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

（1）本試劑盒僅供體外檢測使用，試劑中含有的化學(xué)成分應(yīng)說明接觸人體后產(chǎn)生不良的影響后果。

（2）有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

（3）樣本：對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待。

（4）其他有關(guān)載脂蛋白B測定的注意事項。

15.【標(biāo)識的解釋】

如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。

16.【參考文獻(xiàn)】

應(yīng)當(dāng)注明在編制說明書時所引用的參考文獻(xiàn)，格式要規(guī)范。

17.【基本信息】

符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）對基本信息的要求。

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

產(chǎn)品的注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號

19.【說明書核準(zhǔn)日期及修改日期】

注明該產(chǎn)品說明書的核準(zhǔn)日期。如曾進(jìn)行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時注明說明書的修改日期。

三、審查關(guān)注點

（一）關(guān)注產(chǎn)品預(yù)期用途有關(guān)的描述是否與臨床研究結(jié)論一致。臨床研究用對比試劑和第三方確認(rèn)試劑的預(yù)期用途應(yīng)與申請產(chǎn)品預(yù)期用途一致。申報樣本類型應(yīng)在臨床研究中進(jìn)行驗證。

（二）審查產(chǎn)品技術(shù)要求時應(yīng)注意產(chǎn)品應(yīng)不低于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定。

（三）說明書中預(yù)期用途、樣本類型、儲存條件及有效期、檢驗方法、參考區(qū)間、產(chǎn)品性能指標(biāo)等描述應(yīng)分別與臨床研究資料、穩(wěn)定性研究資料、主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系研究資料、參考區(qū)間研究資料、分析性能評估資料的研究結(jié)論相一致。

（四）干粉試劑應(yīng)提供復(fù)溶穩(wěn)定性研究資料并在說明書儲存條件及有效期中說明。

（五）產(chǎn)品風(fēng)險分析資料的撰寫是否符合YY/T 0316—2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》的要求。

四、編寫單位

河北省食品藥品監(jiān)督管理局。