附件：流行性感冒病毒抗原檢測試劑注冊審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）（2024年第1號）.doc

流行性感冒病毒抗原檢測試劑注冊審查
指導(dǎo)原則（2023年修訂版）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對流行性感冒病毒（以下簡稱流感病毒）抗原檢測試劑注冊申報資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門對注冊申報資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導(dǎo)原則是對流感病毒抗原檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導(dǎo)原則是供注冊申請人和技術(shù)審評人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細的研究資料和驗證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認知水平下制定，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于采用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法等基于抗原抗體特異性反應(yīng)原理，以特定的流感病毒抗原為檢測目標(biāo)，對人口咽拭子、鼻咽拭子、鼻拭子等呼吸道分泌物樣本中的流感病毒進行體外定性檢測的試劑。

流感病毒屬正粘病毒科，是單股、負鏈、分節(jié)段的RNA病毒。根據(jù)核蛋白和基質(zhì)蛋白不同可分為甲、乙、丙、?。ɑ駻、B、C、D）四型。甲型流感病毒根據(jù)病毒表面的血凝素（hemagglutinin，HA）及神經(jīng)氨酸酶（neuraminidase，NA）的蛋白結(jié)構(gòu)和基因特異性，可分為多種亞型。目前發(fā)現(xiàn)的HA和NA分別有18個（H1-18）和11個（N1-11）亞型。乙型流感病毒分為Victoria系和Yamagata系。目前引起流感季節(jié)性流行的病毒是甲型流感病毒中的H1N1、H3N2亞型及乙型流感病毒中的Victoria和Yamagata系。

流感病毒抗原檢測試劑可用于流感的實驗室診斷，甲型流感病毒各亞型的抗原類檢測試劑還可用于區(qū)分季節(jié)性流感病毒和新型甲型流感病毒。　　

本指導(dǎo)原則適用于流行性感冒病毒抗原檢測試劑注冊申請和變更注冊申請的情形。本指導(dǎo)原則僅針對流行性感冒病毒抗原檢測試注冊申報資料中的部分內(nèi)容進行撰寫，其他未盡事宜應(yīng)當(dāng)符合《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》等相關(guān)法規(guī)要求。

二、注冊審查要點

（一）監(jiān)管信息

1.產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關(guān)法規(guī)的要求，如甲型流感病毒抗原檢測試劑盒（免疫層析法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2.其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報前與監(jiān)管機構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品概述、產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報產(chǎn)品上市歷史及其他需說明的內(nèi)容。其中，產(chǎn)品描述中應(yīng)詳述檢測原理、產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價、與同類和/或前代產(chǎn)品的比較等。與同類和或前代產(chǎn)品的比較應(yīng)著重從方法學(xué)、檢驗原理、產(chǎn)品主要性能等方面詳細說明申報產(chǎn)品與目前市場上已獲批同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

（三）非臨床資料

1.產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗報告

1.1產(chǎn)品技術(shù)要求

注冊申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻資料，結(jié)合產(chǎn)品特性按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料以及生產(chǎn)工藝要求。

如有適用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。

1.2產(chǎn)品檢驗報告

甲型、乙型流行性感冒病毒抗原檢測試劑已有國家參考品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家參考品的相關(guān)要求，并使用國家參考品對三批試劑進行檢測。

2.分析性能研究

注冊申請人應(yīng)采用在符合質(zhì)量管理體系的環(huán)境下生產(chǎn)的試劑盒進行所有分析性能研究，提交具體研究方法、試驗方案、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計分析等詳細資料。

如申報產(chǎn)品適用不同的機型，需要提交在不同機型上進行性能評估的研究資料。如申報產(chǎn)品包含不同的包裝規(guī)格，需要對各包裝規(guī)格間的差異進行分析或驗證。對于不同的樣本類型應(yīng)分別提交相應(yīng)的分析性能評估資料。配套的不同保存液或裂解液至少應(yīng)進行檢出限、精密度、包容性、干擾研究。

分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本來源、樣本類型、采集和處理方式、稀釋方式、定值過程及數(shù)據(jù)等。研究中采用的流行性感冒病毒陽性樣本，應(yīng)采用合理方法確定其陰陽性和滴度/濃度水平，并提交具體的試驗資料。分析性能評估用樣本一般應(yīng)為真實樣本或病毒培養(yǎng)物，如需稀釋應(yīng)采用陰性基質(zhì)進行稀釋。

2.1樣本穩(wěn)定性

應(yīng)充分考慮實際使用過程中樣本采集、處理、運輸及保存等各個階段的條件，對不同類型樣本的穩(wěn)定性分別進行評價并提交研究資料。內(nèi)容包括建議的保存條件、保存液、裂解液和運輸條件（如涉及）等。如樣本采集后需加入保存液、裂解液等，應(yīng)同時對處理后的樣本進行樣本穩(wěn)定性的研究。建議對不同的滅活方式進行驗證（如適用）。

2.2適用的樣本類型

列明產(chǎn)品適用的樣本類型。

2.3準(zhǔn)確度

采用申報試劑與臨床診斷或已上市產(chǎn)品，同時檢測臨床樣本，比較檢測結(jié)果之間的一致性程度，進行申報試劑的準(zhǔn)確度評價。

樣本應(yīng)選擇符合樣本穩(wěn)定性的預(yù)期人群樣本，研究應(yīng)納入一定數(shù)量的陰性和陽性樣本，并注意包含一定數(shù)量的陽性判斷值附近的樣本和干擾樣本。

2.4企業(yè)參考品驗證

根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進行檢驗并提供詳細的試驗數(shù)據(jù)。

2.5精密度

應(yīng)對精密度指標(biāo)，如標(biāo)準(zhǔn)差或變異系數(shù)等的評價標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求。應(yīng)考慮運行、時間、操作者、儀器、試劑批次和地點等影響精密度的條件，設(shè)計合理的精密度試驗方案進行評價。

設(shè)定合理的精密度評價周期，例如：為期至少20天的檢測，具體方案可參考性能評價相關(guān)文件進行。

應(yīng)采用臨床樣本或病毒培養(yǎng)物進行精密度評價，應(yīng)至少包含3個水平：陰性樣本、檢出限水平樣本、中/強陽性樣本，并根據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)定適當(dāng)?shù)木芏纫?，例如?/p>

陰性樣本：待測物濃度為零濃度，陰性符合率應(yīng)為100%（n≥20）。

檢出限水平樣本：檢測檢出限水平樣本陽性檢出率應(yīng)高于95%（n≥20）。

中/強陽性樣本：待測物濃度呈中度到強陽性，陽性符合率為100%，且CV≤10%（n≥20），或條帶結(jié)果顯色均一。

2.6檢出限

2.6.1檢出限的確定

將不同來源的至少3份流感病毒樣本分別梯度稀釋于與適用樣本一致的基質(zhì)中，進行檢出限的確定。每個濃度梯度重復(fù)檢測不少于20次，將具有95%陽性檢出率的濃度水平作為檢出限。

申請人應(yīng)對申報產(chǎn)品聲稱可檢測流感病毒的類型及其亞型分別進行檢出限建立研究，甲型流感病毒應(yīng)至少包括H1N1、H3N2亞型，乙型流感病毒應(yīng)包括Victoria系和Yamagata系。

2.6.2檢出限的驗證

另外選擇具有時間和區(qū)域特征性的至少3個臨床樣本或病毒培養(yǎng)物在檢出限濃度水平進行驗證，應(yīng)達到95%陽性檢出率。

檢出限驗證的樣本型別應(yīng)覆蓋甲型流感病毒H1N1、H3N2、H5N1和H7N9亞型，乙型流感Yamagata系和Victoria系以及近3年內(nèi)我國出現(xiàn)的新的流行亞型，具體可參考中國國家流感中心發(fā)布的流感監(jiān)測報告。

應(yīng)提供詳細的病毒滴度/濃度的確定方法，同時應(yīng)詳細描述病毒樣本的確認方法及驗證結(jié)果。

2.7包容性 

驗證樣本型別應(yīng)覆蓋甲型流感病毒H1N1、H3N2、H5N1和H7N9亞型，乙型流感病毒Yamagata系和Victoria系以及近3年內(nèi)出現(xiàn)的新的流行亞型，以考察對不同流感病毒亞型的檢出能力。每種亞型使用具有時間和區(qū)域特征性的不同來源的多例樣本進行驗證，驗證內(nèi)容應(yīng)包括重復(fù)性、檢出限等，提供樣本及濃度的確認方法、試驗數(shù)據(jù)。

包容性使用的樣本與檢出限驗證使用的樣本應(yīng)為不同的樣本。

2.8分析特異性

2.8.1交叉反應(yīng)驗證

用于流感病毒抗原檢測試劑交叉反應(yīng)驗證的病原體種類主要考慮以下幾方面：抗原結(jié)構(gòu)的同源性、易引起相同或相似的臨床癥狀、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物。

建議在病毒和細菌感染的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進行交叉反應(yīng)的驗證。通常，細菌感染的水平為106 cfu/ml或更高，病毒為105 pfu/ml或更高。申請人應(yīng)提供所有用于交叉反應(yīng)驗證的病毒和細菌的來源、種屬/型別和濃度確認等試驗資料。

首先，應(yīng)在流感病毒不同類型和亞型間進行交叉反應(yīng)驗證；其次，采用其他的病原微生物進行驗證（見表1）。

有關(guān)交叉反應(yīng)驗證的信息應(yīng)在產(chǎn)品說明書的【產(chǎn)品性能指標(biāo)】項中有所體現(xiàn)。

2.8.2干擾實驗

應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，針對可能存在的內(nèi)源性/外源性物質(zhì)（見表2）干擾情況進行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，在待測流感病毒檢出限水平和陰性水平，進行干擾實驗驗證。申請人應(yīng)采用申報產(chǎn)品聲稱可檢測流感病毒的每種亞型的至少兩種病毒株對呼吸道樣本中物質(zhì)的潛在抑制影響進行評估。

2.9高劑量鉤狀效應(yīng)

應(yīng)評估高劑量鉤狀效應(yīng)并提交研究資料。

建議采用高濃度的待測流感病毒抗原樣本進行梯度稀釋后分別檢測，每個梯度重復(fù)3至5次，將顯色深度或檢測信號值隨濃度升高反而變淺或降低時的濃度，作為不出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)時的最高濃度。

2.10反應(yīng)體系

2.10.1反應(yīng)條件確定：注冊申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時間、判讀時間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。

2.10.2反應(yīng)體系中樣本加樣方式及加樣量確定：通過試驗確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進行處理后方可用于最終檢測，還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法等進行研究。

3.穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究主要包括實時穩(wěn)定性、開瓶/開封穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性等，注冊申請人可根據(jù)實際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實施方案、詳細的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實時穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4.陽性判斷值研究

提交對申報試劑陰性/灰區(qū)/陽性等結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off，CO）確定的研究資料，包括具體的試驗方案、人群及受試者樣本選擇、評價標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。陽性判斷值研究用樣本來源應(yīng)具有多樣性和代表性，考慮不同年齡、地域、不同時間和感染階段等因素，盡量納入含有干擾物質(zhì)或其他易引起交叉反應(yīng)病原體的樣本。如果產(chǎn)品適用不同樣本類型，需要對所有樣本類型進行陽性判斷值的驗證。

如適用，可采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve, ROC）的分析方式來選擇確定合理的陽性判斷值；如結(jié)果存在灰區(qū)（equivocal zone），應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。如采用其他方法對陽性判斷值進行確認研究，應(yīng)說明這種方法的合理性。

提交陽性判斷值研究所用樣本的背景信息列表，至少包括性別、年齡、臨床診斷信息、樣本來源機構(gòu)、檢測結(jié)果等信息。

5.其他資料 

5.1主要原材料研究資料

此產(chǎn)品的主要原材料包括抗體、質(zhì)控品（線）、參考品等。應(yīng)提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)等相關(guān)研究資料。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細制備過程；如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗資料、生產(chǎn)商提供的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質(zhì)量檢驗資料，生產(chǎn)商應(yīng)固定，不得隨意更換。

5.1.1特異性抗體

特異性抗體（如抗甲型流感病毒單克隆抗體、抗乙型流感病毒單克隆抗體等）是該類產(chǎn)品的關(guān)鍵原材料。由于流感病毒包含不同類型和亞型，且不同地域、不同人群感染的毒株之間存在差異，因此在選擇抗體原料時，應(yīng)注重結(jié)合表位的選擇，避免毒株間差異造成的假陰性，原材料研究資料中應(yīng)詳述該方面的考慮。

首先應(yīng)詳述抗體所針對的抗原表位、抗體制備所用免疫原以及確定該抗體作為主要原材料的依據(jù)，此外應(yīng)提交抗體來源、制備、篩選、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價、功能性試驗等）等詳細試驗資料。

自制抗體，如使用天然抗原作為免疫原，應(yīng)提供該天然抗原的來源；如使用重組抗原或其他人工合成抗原作為免疫原，應(yīng)提供相應(yīng)的核酸或者蛋白序列信息。針對抗體的制備、鑒定等過程，應(yīng)提交詳細的研究資料和工藝穩(wěn)定性驗證資料。

外購抗體，應(yīng)詳述抗體的名稱及生物學(xué)來源，供應(yīng)商名稱；提交供應(yīng)商選擇的研究資料及供應(yīng)商出具的抗體性能指標(biāo)及檢驗報告。

建議采用企業(yè)參考品及臨床真實樣本進行原材料的篩選，應(yīng)當(dāng)提供陰陽性檢測結(jié)果、色度及彩色照片。

5.1.2其他原料

除上述原材料外，產(chǎn)品中還包含其他原料，如膠體金、熒光微粒、磁微粒、硝酸纖維素膜、微孔板、發(fā)光底物、標(biāo)記物等，均應(yīng)進行選擇及驗證，并提交相關(guān)資料。明確供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

5.1.3試劑盒質(zhì)控品/質(zhì)控線

產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置合理的質(zhì)控品/質(zhì)控線。質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個水平，免疫層析類產(chǎn)品應(yīng)包含質(zhì)控線。提交相關(guān)原料的來源、選擇和陰、陽性確認等相關(guān)研究資料，明確供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。注冊申請人應(yīng)對質(zhì)控品/質(zhì)控線的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求（試驗有效性的判斷）。

5.1.4企業(yè)參考品

該類產(chǎn)品的企業(yè)參考品一般包括陽性參考品、陰性參考品、檢出限參考品和重復(fù)性參考品。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品性能驗證的實際需要設(shè)置企業(yè)參考品。

應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認方法或試劑等相關(guān)驗證資料。企業(yè)參考品可采用臨床樣本，或者使用病毒培養(yǎng)液加入陰性基質(zhì)。企業(yè)參考品的設(shè)置建議如下： 

5.1.4.1陽性參考品

陽性參考品應(yīng)設(shè)置不同的濃度水平，并應(yīng)根據(jù)申報產(chǎn)品聲稱可檢測流感病毒的類型及亞型情況分別設(shè)置，甲型流感病毒應(yīng)至少包括H1N1、H3N2亞型；乙型流感病毒應(yīng)包括Victoria系和Yamagata系。

5.1.4.2陰性參考品

陰性參考品應(yīng)考慮檢測特異性的評價，納入正常臨床樣本、含除待測類型流感病毒外其他類型流感病毒陽性的樣本及含有冠狀病毒、腸道病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒等其他病原體陽性的樣本。 

5.1.4.3檢出限參考品

可設(shè)置系列稀釋梯度樣本，其中應(yīng)包含檢出限水平，應(yīng)針對聲稱可檢測流感病毒的不同類型及常見亞型分別設(shè)置。

5.1.4.4重復(fù)性參考品

建議包括高、低兩個濃度的樣本，其中一個濃度應(yīng)為檢出限附近的濃度。應(yīng)針對申報產(chǎn)品聲稱可檢出流感病毒的不同類型及常見亞型分別設(shè)置。

5.2生產(chǎn)工藝的研究資料

5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

5.2.2生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

5.2.3包被/標(biāo)記工藝研究，注冊申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過試驗確定上述指標(biāo)的最佳組合。

5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

（四）臨床評價資料

1.臨床試驗機構(gòu)

申請人應(yīng)選擇至少3家備案的醫(yī)療器械臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗?？紤]到流感病毒不同病毒株的區(qū)域性特征較強，建議申請人在國內(nèi)不同區(qū)域選擇臨床單位，盡量使各單位的臨床樣本具有一定的區(qū)域代表性；臨床試驗機構(gòu)應(yīng)具有呼吸道疾患診療、病毒分離培養(yǎng)鑒定方法或分子生物學(xué)方法檢測的優(yōu)勢。在整個實驗中，試驗體外診斷試劑（以下稱考核試劑）和對比方法都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。

2.臨床試驗適用人群和樣本類型

臨床試驗應(yīng)按照入組標(biāo)準(zhǔn)/排除標(biāo)準(zhǔn)納入受試者，應(yīng)選擇具有流感癥狀/體征(例如：咳嗽、鼻塞、鼻漏、咽喉疼痛、發(fā)燒、頭疼或肌痛等)、流感相似癥狀或有密切接觸史的人群作為適用人群，應(yīng)盡量覆蓋各個年齡段人群。對于通用型甲型、乙型流感病毒抗原檢測試劑，臨床試驗人群應(yīng)至少涵蓋近3年主要流行亞型，可參考中國國家流感中心的流感監(jiān)測報告。

臨床試驗應(yīng)對考核試劑聲稱的各種樣本類型分別進行驗證，應(yīng)采用臨床原始樣本進行臨床試驗，臨床樣本的處理和保存等應(yīng)分別滿足考核試劑及對比試劑說明書的相關(guān)要求。

3.臨床試驗對比方法

3.1對于已有同類產(chǎn)品上市的試劑，選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對比試劑，采用考核試劑與之進行對比試驗研究，證明其與已上市產(chǎn)品等效或優(yōu)于已上市產(chǎn)品。

3.2對于無同類產(chǎn)品上市的新樣本類型試劑，在充分考慮樣本類型差異的前提下，臨床試驗對比方法可選擇樣本類型等具有可比性的已上市同類抗原或核酸試劑。

4.臨床試驗最低樣本量

4.1對于已有同類產(chǎn)品上市的試劑

對于已有同類產(chǎn)品上市的試劑，建議采用單組目標(biāo)值法進行最低樣本量的估算，通過陽性和陰性符合率分別估算陽性和陰性樣本量，并詳細描述各參數(shù)的確定依據(jù)。陽性和陰性符合率的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（P0）建議不低于90%。當(dāng)評價指標(biāo)P接近100%時，該樣本量估算方法可能不適用，應(yīng)考慮選擇更加適宜的方法進行樣本量估算和統(tǒng)計學(xué)分析，如精確概率法等。

如適用于多種樣本類型，在滿足總陽性和總陰性樣本量分別滿足統(tǒng)計學(xué)估算的前提下，每種樣本類型的陽性和陰性樣本例數(shù)，應(yīng)均不少于70例。

4.2對于無同類產(chǎn)品上市的新樣本類型試劑

可參考4.1小節(jié)樣本量的估算方法, 臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（P0）可根據(jù)實際情況設(shè)置，且應(yīng)具有充分的依據(jù)。

5.統(tǒng)計學(xué)分析

常選擇交叉四格表形式總結(jié)兩種方法的結(jié)果，評價產(chǎn)品陽性符合率/陰性符合率、靈敏度/特異度，并計算相應(yīng)的95%置信區(qū)間。不同樣本類型和不同對比方法均應(yīng)分別進行統(tǒng)計分析。對各臨床試驗機構(gòu)的病例數(shù)、年齡分布情況進行分類匯總。

對兩種試劑檢測結(jié)果不一致的樣本，應(yīng)采用臨床參考標(biāo)準(zhǔn)或臨床上普遍認為質(zhì)量較好的第三種同類試劑進行復(fù)核，同時結(jié)合患者的臨床病情對差異原因及可能結(jié)果進行分析。

6.其他

對于已批準(zhǔn)上市的甲型流感病毒抗原（通用型）檢測試劑，如在其注冊證有效期內(nèi)出現(xiàn)了甲流病毒新亞型的暴發(fā)流行，建議申請人對甲流病毒新亞型進行臨床試驗，分別對來自甲型流感病毒新亞型感染、其他常見的流感病毒亞型（如當(dāng)年流行的季節(jié)性甲型流感病毒）及非流感病毒感染但具有流感樣癥狀的患者的新鮮樣本進行比對試驗。申請人應(yīng)針對產(chǎn)品預(yù)期用途覆蓋病毒亞型的變化提出變更注冊申請，按照法規(guī)要求提交臨床試驗等資料。

7.境外臨床試驗數(shù)據(jù)的認可

境外臨床試驗數(shù)據(jù)應(yīng)符合《接受醫(yī)療器械境外臨床試驗數(shù)據(jù)技術(shù)指導(dǎo)原則》和《使用體外診斷試劑境外臨床試驗數(shù)據(jù)的注冊審查指導(dǎo)原則》的相關(guān)要求。應(yīng)提交完整的臨床試驗方案、報告和倫理審查意見，以及該數(shù)據(jù)適用于中國患者人群的論證資料、境內(nèi)外臨床試驗質(zhì)量管理差異的對比資料和臨床試驗質(zhì)量管理差異對于臨床試驗結(jié)果影響的論證資料。

申請人應(yīng)根據(jù)上述臨床試驗技術(shù)審評要求，論證境外臨床試驗數(shù)據(jù)的充分性。

8.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計科學(xué)合理的臨床試驗方案。各臨床試驗機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床試驗機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應(yīng)確定嚴格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。各研究單位選用的對比試劑應(yīng)完全一致，以便進行合理的統(tǒng)計學(xué)分析。另外，考核試劑的樣本類型不應(yīng)超越對比試劑對樣本類型的檢測要求，如果選擇了對比試劑適用樣本類型以外的樣本，則應(yīng)選擇其他合理方法對額外的樣本類型進行驗證。

9.臨床試驗小結(jié)和報告

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，臨床試驗小結(jié)和報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法?！　　　　?/p>

（五）產(chǎn)品說明書和標(biāo)簽樣稿

產(chǎn)品說明書格式應(yīng)滿足《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求。產(chǎn)品說明書的所有內(nèi)容均應(yīng)與注冊申請人提交的注冊申報資料的相關(guān)研究結(jié)果保持一致。如某些內(nèi)容引用自參考文獻，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進行標(biāo)注，并單獨列明參考文獻的相關(guān)信息。

產(chǎn)品說明書編寫建議參考附件中的模板。

1.【預(yù)期用途】

1.1本產(chǎn)品用于體外定性檢測人體口咽拭子、鼻咽拭子、鼻拭子等呼吸道分泌物樣本（根據(jù)具體情況描述）中X型流感病毒抗原（根據(jù)實際情況描述）。

1.2簡單介紹流感病毒的病原學(xué)特征、流行病學(xué)特征以及臨床表現(xiàn)和現(xiàn)有診斷方法等。

1.3強調(diào)本試劑盒檢測結(jié)果僅供臨床參考，不得作為臨床診斷的唯一標(biāo)準(zhǔn)。建議結(jié)合患者臨床表現(xiàn)和其他實驗室檢測對病情進行綜合分析。

2.【檢驗原理】

描述試劑盒的技術(shù)原理，可結(jié)合圖示進行說明。

3.【主要組成成分】

3.1詳細說明試劑盒內(nèi)各組分的名稱、數(shù)量、成分、濃度等信息，如含有生物源性物質(zhì)，應(yīng)說明其（生物學(xué)）來源、活性及其他特性；對于免疫層析法試劑應(yīng)描述試劑條/卡結(jié)構(gòu)組成。說明不同批號試劑盒中各組分是否可以互換。

3.2試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組分，應(yīng)列出相關(guān)試劑的生產(chǎn)企業(yè)、產(chǎn)品名稱、注冊證號/備案號或貨號等信息。

4.【儲存條件及有效期】

說明試劑盒的效期穩(wěn)定性、開封穩(wěn)定性等，應(yīng)標(biāo)明具體的儲存條件及效期，明確溫度、濕度（如適用）要求。

5.【適用儀器】（如適用）

注明所有適用的儀器型號，并提供與儀器有關(guān)的重要信息以指導(dǎo)用戶操作。酶標(biāo)儀應(yīng)明確波長要求。

6.【樣本要求】

說明對樣本采集、處理、保存等方面的要求，包括采樣要求、采集器的要求、離心條件、運送條件、保存條件及效期、凍融要求、預(yù)處理方法等，相關(guān)內(nèi)容應(yīng)經(jīng)過前期驗證。

7.【檢驗方法】

7.1試驗環(huán)境：檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求、濕度要求（如適用）等。

7.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。

7.3樣本稀釋的方法。

7.4試驗條件：操作步驟、溫度、時間、儀器條件等。

7.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。

7.6可采用圖示形式顯示正確的檢驗操作方法、程序及注意事項等。特別注意應(yīng)強調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時間。

7.7特別說明檢驗操作過程中的注意事項。

8.【陽性判斷值】

明確陽性判斷值，簡要描述陽性判斷值確定的試驗方法。

9.【檢驗結(jié)果的解釋】

描述檢測結(jié)果的判定標(biāo)準(zhǔn)或計算方法，如有灰區(qū)判定，應(yīng)詳細說明灰區(qū)樣本的處理方法。建議可采用圖示形式描述結(jié)果判讀方法。

10.【檢驗方法的局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進行相關(guān)說明。例如：

10.1本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床診治應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

10.2有關(guān)假陽性結(jié)果的可能性分析

如果樣本在運輸、處理過程中發(fā)生交叉污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

試驗過程中使用的耗材、設(shè)備等受污染，則可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果。

10.3有關(guān)假陰性結(jié)果的可能性分析

10.3.1不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運、儲存及處理、樣本中病原體含量過低均有可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

10.3.2該病原體的突變可能會導(dǎo)致假陰性結(jié)果。

10.3.3對于突發(fā)的新型流感病毒，其檢測的最適樣本類型以及感染后的最佳采樣時間（病毒滴度峰值）可能尚未確認，因此，在同一患者分次、多部位采集樣本會降低假陰性結(jié)果的可能。

10.3.4未經(jīng)驗證的其他干擾因素，可能會導(dǎo)致假陰性結(jié)果（如有）。

10.4受抗原類檢測試劑方法學(xué)的限制，其最低檢測限（分析靈敏度）普遍較核酸類試劑低，故實驗人員應(yīng)對陰性結(jié)果給予更多的關(guān)注，需結(jié)合其他檢測結(jié)果綜合判斷，建議對有疑問的陰性結(jié)果采用核酸檢測或病毒分離培養(yǎng)鑒定方法進行復(fù)核。

10.5如果申報試劑用于甲/乙型流感病毒的檢測，應(yīng)對陽性實驗結(jié)果做以下建議：建議進一步實驗以確認甲/乙型流感病毒的亞型，并向當(dāng)?shù)毓残l(wèi)生預(yù)防機構(gòu)咨詢協(xié)商處理。

11.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

簡述以下性能指標(biāo)：

11.1對于甲型流感病毒抗原（通用型）檢測試劑，應(yīng)首先說明有關(guān)其性能指標(biāo)確定的病毒亞型基礎(chǔ)及有關(guān)新型甲型流感病毒的警示，如：以下性能指標(biāo)基于甲型H1和H3亞型確認，當(dāng)其他新型甲型流感病毒出現(xiàn)時，其相關(guān)性能指標(biāo)可能有所改變。

11.2甲型流感病毒抗原（通用型）各亞型驗證：用于甲型流感病毒（通用型）抗原檢測試劑，應(yīng)在此列出所有驗證過的各亞型病毒株的信息。

11.3國家標(biāo)準(zhǔn)品和企業(yè)參考品符合情況。

11.4檢出限：簡要介紹評價方法、所用病毒株或樣本情況以及評價結(jié)果。

11.5對包容性的研究情況進行總結(jié)。

11.6對精密度的研究情況進行總結(jié)。

11.7分析特異性

11.7.1交叉反應(yīng)：詳述交叉反應(yīng)驗證的病原體種類，及有/無交叉反應(yīng)的濃度水平。

11.7.2干擾物質(zhì)：說明驗證的干擾物質(zhì)種類及有/無干擾反應(yīng)的濃度水平。

11.8鉤狀（HOOK）效應(yīng)：對高劑量鉤狀效應(yīng)的驗證情況進行總結(jié)。

11.9臨床試驗：簡要介紹試驗方法、受試者及樣本、試驗結(jié)果和結(jié)論等。

12.【注意事項】

有關(guān)試驗操作、樣本保存及處理等注意事項。

三、參考文獻

[1]國家市場監(jiān)督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法：國家市場監(jiān)督管理總局令第48號[Z].

[2]國家藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告：國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號[Z].

[3]國家藥品監(jiān)督管理局.體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導(dǎo)原則：國家藥品監(jiān)督管理局2021年第72號[Z].

[4]國家藥監(jiān)局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心.定性檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則：國家藥監(jiān)局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心2022年第36號[Z].

[5]國家衛(wèi)生健康委員會、國家中醫(yī)藥管理局.流行性感冒診療方案（2020）

[6]中國疾病預(yù)防控制中心.中國流感疫苗預(yù)防接種技術(shù)指南（2022-2023）